技術(shù)知識(shí)
小鼠昆蟲等動(dòng)物使用冷凍組織研磨機(jī)進(jìn)行研磨效果理想嗎?
在樣品進(jìn)行研磨的過程中需要準(zhǔn)確的把握好樣品的不同的研磨條件及環(huán)境,在實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物的研磨占據(jù)大半,因此如何將樣品研磨至理想狀態(tài)至關(guān)重要,其中測(cè)博冷凍組織研磨機(jī)能通過研磨珠在樣品管內(nèi)來(lái)回不規(guī)則撞擊及摩擦。
冷凍組織研磨機(jī)怎么對(duì)動(dòng)物-昆蟲進(jìn)行有效研磨?下面一起來(lái)了解一下詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)過程吧!
此次實(shí)驗(yàn)主要是以昆蟲作為研究材料,需要高通量提取核酸、蛋白進(jìn)行遺傳或是生理生化分析研究的實(shí)驗(yàn)。
需要材料:蠶蛾、蠶蛹組織
首先取一只蠶蛾將其剪碎后取其一塊直徑不超過8mm的身體組織,然后放置于EP/離心管中,而后將管中加入1課碳化鎢研磨珠,之后將加完樣品和研磨珠的EP管在適配器上擺好開蓋后加液氮冷凍至3~5分鐘,等至樣品在冷凍的情況下脫去水分后及時(shí)將EP管的蓋封閉上而后繼續(xù)在液氮中遇冷3分鐘后迅速將適配器安置到凈信動(dòng)物組織研磨儀上,研磨幾分鐘后可得到細(xì)碎的樣品粉末用于提核酸或蛋白。
動(dòng)物組織研磨儀能夠在幾秒到幾分鐘內(nèi)輕松實(shí)現(xiàn)樣品的研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁,可達(dá)到5微米的精細(xì)的研磨,針對(duì)不同的樣品,需要用不同的條件來(lái)處理,這里面主要涉及研磨速度、研磨時(shí)間、研磨溫度和研磨珠的選擇。