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用途： 沙門(mén)氏、金黃色葡萄、志賀、大腸桿菌、副溶血、單增李斯特和蠟樣芽孢菌檢測(cè)

產(chǎn)品特點(diǎn) Features

本試劑盒采用多重?zé)晒釶CR技術(shù)，針對(duì)食品中常見(jiàn)7種致病菌特有的基因的序列，設(shè)計(jì)不同熒光標(biāo)記的探針，通過(guò)熒光信號(hào)的變化檢測(cè)食品中是否含有特定的致病菌。該試劑盒適用于多種樣本（如食品、食品原料、水產(chǎn)品、牛奶和奶制品、飲料、酒類(lèi)和化妝品等）中沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、志賀氏菌、大腸桿菌、副溶血弧菌、單增李斯特氏菌和蠟樣芽孢桿菌等7種重要致病菌特異性基因的檢測(cè)。

儲(chǔ)存條件及有效期：試劑盒置于-20℃冰箱中凍存，試劑盒有效期為一年。

操作流程 process

食品中常見(jiàn)7種致病菌熒光PCR檢測(cè)試劑盒操作流程：

1）從試劑盒中取出水、PCR反應(yīng)液、P溶液、陽(yáng)性和陰性核酸對(duì)照，室溫融化，置冰箱4℃待用。

2）在1克待檢食品樣本中加入5 mL水，研磨后，3000 g離心3 min,取上清200 μL用柱法或磁珠法提取細(xì)菌基因組DNA，并溶于50 μL水中。

3）反應(yīng)體系配制：試劑使用前，振蕩混勻，3000rpm離心2秒。

在0.2mL平蓋PCR薄壁管或平蓋PCR八聯(lián)管中，按上述加樣量配制反應(yīng)體系液（陽(yáng)性和陰性對(duì)照管同樣配制，待檢DNA溶液換為試劑盒提供的陽(yáng)性核酸對(duì)照和陰性核酸對(duì)照，加樣量分別為3μL），蓋好管蓋，去除管中氣泡，并用離心機(jī)甩離，確保所有液體都在管底。將PCR 管放入熒光PCR檢測(cè)儀中。

4）熒光PCR檢測(cè)儀循環(huán)條件設(shè)定。

產(chǎn)品細(xì)節(jié) Details

技術(shù)參數(shù) parameter

質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)：

陰性對(duì)照的CT值應(yīng)等于None；同時(shí)陽(yáng)性對(duì)照的CT值應(yīng)小于30。

否則，此次試驗(yàn)視為無(wú)效。（CT值應(yīng)以S型曲線拐點(diǎn)的循環(huán)數(shù)為準(zhǔn)）

結(jié)果判定：

1）CT值為None的樣本判定為陰性；CT值小于等于38的樣本判定為陽(yáng)性。

2）CT值大于38的樣本建議重做。重做后樣本CT值小于等于38則判定為陽(yáng)性，否則判定為陰性。

3）如果樣品志賀氏菌陽(yáng)性，則P2溶液反應(yīng)管中FAM和VIC/HEX通道均有擴(kuò)增曲線。

4）對(duì)于某些未呈現(xiàn)S型曲線，但本底較高的樣本，應(yīng)判定為陰性。

實(shí)驗(yàn)案例展示